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作者:admin?????時間:2015-08-31 08:11:58
產品簡介:
產品編號 | 產品名稱 | 產品包裝 |
D2722 | pCMV-N-Flag | 1μg |
pCMV-N-Flag是晶安生物自行研發的用于在哺乳動物細胞中表達N端和Flag tag(Flag標簽)融合的目的
蛋白的表達質粒。含有CMV啟動子可以高效啟動目的蛋白在細胞中的表達;在多克隆位點的5'端含有一個可以編碼Flag標簽的序列,因此可以表達出含有Flag標簽的融合蛋白,可以方便地使 用抗Flag的抗體來識別目的蛋白,有利于目的蛋白檢測和分離純化。質粒為卡那霉素抗性。轉染細胞后,可使用G418篩選穩定表達目的蛋白的細胞株。
pCMV-N-Flag質粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide &nb sp; Position
CMV promoter &nb sp; 1–602
T3 promoter and T3 primer binding site 620–639
Flag tag &nb sp; 679–702
multiple cloning site 705 –778
T7 promoter and T7 primer binding site 821–842
SV40 polyA signal &nb sp; 854–1237
f1 origin of ss-DNA replication 1375–1681
bla promoter &nb sp; 1706–1830
SV40 promoter &nb sp; 1850–2188
neomycin/kanamycin resistance ORF 2223–3014
HSV-thymidine kinase(TK)polyA signal 3015–3473
pUC origin &nb sp; 3602–4269
pCMV-N-Flag質粒的圖譜如下:
pCMV-N-Flag的多克隆位點的詳細圖譜如下:
&nb sp; Flag tag
SacI M D Y K D D D D K
651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCCATGGA TTACAAGGAT GACGACGATA
CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGGTACCT AATGTTCCTA CTGCTGCTAT
XmaI PstI
SmaI BamHI HindIII EcoRI EcoRV SalI BglII
701 AGAGCCCGGG CGGATCCAAG CTTCTGCAGG AATTCGATAT CGTCGACAGA
TCTCGGGCCC GCCTAGGTTC GAAGACGTCC TTAAGCTATA GCAGCTGTCT
XhoI XbaI ApaI
751 TCTCTCGAGT CTAGAACTAG TGGGCCCGGT ACCTTAATTA ATTAAGGTAC
AGAGAGCTCA GATCTTGATC ACCCGGGCCA TGGAATTAAT TAATTCCATG
pCMV-N-Flag中沒有的酶切位點(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-Flag)包括:
Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I
Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I
BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I
Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I
Sca I Spl I
pCMV-N-Flag中的單酶切位點(Restriction enzymes that cut pCMV-N-Flag once)包括:
Nde I CA`TA,TG 241 |
Pvu I CG,AT`CG 855 |
pCMV-N-Flag質粒中對于插入片斷進行測序時,推薦使用的正向測序引物T3和反向測序引物T7的序列如下:
T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(821-842): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-N-Flag的全序列信息: D2722 pCMV-N-Flag-seq.txt
包裝清單:
產品編號 |
產品名稱 |
包裝 |
D2722 |
pCMV-N-Flag |
1μg |
— |
說明書 |
1份 |
保存條件:
-20℃保存。
注意事項:
本質粒未經晶安生物書面許可不得用于任何商業用途,也不得移交給訂貨人所在實驗室外的任何個人
或單位。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。